O presente manual tem por objetivo orientar os funcionários, professores e alunos regulares da Disciplina de Genética da UNIFESP, quanto a alguns aspectos básicos relacionados às boas práticas de laboratório.
Essas práticas nada mais são que um conjunto de normas e orientações relacionadas à conduta de trabalho no ambiente laboratorial, que deve funcionar como um guia a ser seguido no decorrer de qualquer atividade realizada no laboratório, para garantir a segurança de funcionários e alunos, e o sucesso dos experimentos.
Docentes:
Profa Dra Maria Isabel Melaragno
Profa Dra Janete Cerutti
Profa Dra Isabel Céspedes
Profa Dra Elizabeth Chen
Profa Dra Debora Gusmão Melo
Prof. Dr. Alexandre Ferro Aissa
Funcionários:
Vanessa Kiyomi Ota – biomédica
Cleide Ferreira – técnica de laboratório
Lilian Lemos – secretária
Para iniciar as atividades de pesquisa no laboratório, os alunos deverão obrigatoriamente preencher no Livro de Registros do Laboratório os seguintes dados: nome completo, data de nascimento, endereço, telefones para contato e nome do orientador.
O controle das chaves do laboratório e acesso ao pátio do prédio será realizado pelo orientador responsável pelo aluno.
O acesso às chaves de anfiteatros, sala de coleta e acesso ao prédio da diretoria deverá ser registrado, informando-se os horários de retiradas e devoluções e o nome do responsável. Somente poderão realizar a retirada das chaves as pessoas previamente autorizadas.
Para realizar atividades no laboratório fora do horário de expediente do laboratório (como sábados e domingos), o aluno deverá informar aos técnicos havendo necessidade da ciência de seu orientador, ficando esse responsável.
O responsável por um novo aluno deverá Informar aos demais do laboratório sobre o novo componente do grupo ou visitante temporário;
Certificar-se de que o novo aluno receba e se informe sobre o conteúdo do Manual do Laboratório;
O aluno novo deverá conversar com os biomédicos do setor e acatar as opiniões e sugestões nos métodos utilizados na rotina e que, em caso de dúvida, procure um aluno mais experiente ou o seu orientador;
O aluno que, ao executar uma técnica ou atividade pela primeira vez, deve estar acompanhado, em todas as etapas, até ser autorizado a executá-la de forma independente;
O aluno que, quando houver necessidade de reposição de uma solução ou material, informe ANTES DE SEU TÉRMINO;
Nunca utilize um aparelho, por mais simples que lhe pareça, sem se certificar de conhecer o seu funcionamento. Em caso de dúvida, procure os biomédicos do setor, responsáveis pelos aparelhos;
Ter responsabilidade de deixar sempre organizado e limpo o local após o trabalho;
Ter a responsabilidade de acatar as recomendações de ética, cidadania e biossegurança.
Higiene e hábitos pessoais
Conhecer as regras do laboratório e riscos dos procedimentos que irá realizar;
Uso OBRIGATÓRIO de luvas e avental durante os procedimentos de laboratório;
Utilizar protetores faciais e/ou oculares (óculos se segurança) sempre que houver necessidade de manuseio ou armazenamento de substâncias químicas, principalmente as voláteis;
Usar calça comprida e sapatos fechados durante os procedimentos no laboratório;
Manter cabelos longos presos;
Não comer ou beber na área laboratorial;
Não correr nos corredores e dependências do laboratório;
De preferência evitar o uso de acessórios e adornos durante as atividades laboratoriais.
Os crachás presos com cordão em volta do pescoço devem estar sob o jaleco dentro da área analítica para evitar acidentes;
Não colocar objetos à boca;
Lavar as mãos com água e sabão após os procedimentos no laboratório;
Remover as luvas sempre que for necessário o contato com superfícies de telefones, fechaduras, interruptores e torneiras, evitando a contaminação;
Manter o avental limpo e lavá-lo separado da roupa doméstica;
Manter objetos pessoais, casacos e bolsas em local adequado evitando levá-los ao ambiente do laboratório;
Evitar trabalhar sozinho - a companhia é recomendada para ajuda nos socorros em casos de acidentes;
Manter a atenção durante todo o tempo em que estiver no ambiente do laboratório, já que distrações contribuem para a ocorrência de acidentes.
Reagentes
Tomar conhecimento das propriedades físicas e da toxicidade dos reagentes antes de iniciar um procedimento;
Ao abrir um reagente de uso comum, identificar o responsável e a data de abertura;
Todos os recipientes que contenham material e reagentes devem estar devidamente rotulados, com clara identificação do conteúdo, data de preparo e nome;
Não pipetar com a boca;
Não leve a mão a boca ou aos olhos quando estiver manuseando produtos químicos;
Não deixe frascos de reagentes abertos;
Cuidar da limpeza adequada dos materiais utilizado para não contaminar os reagentes;
Não aquecer recipientes fechados;
Nunca retornar sobras de soluções e/ou reagentes aos frascos de origem, pois provavelmente ocorrerá contaminação do mesmo; realizar o descarte adequado;
Verificar o armazenamento correto dos reagentes (principalmente temperatura).
Equipamentos
É imprescindível que se faça um checklist de tudo que será usado antes do início do procedimento, como: descartáveis, volumes de reagentes, agendamento de equipamentos, material estéril, etc.
Ter treinamento específico nos aparelhos que irá utilizar e só utilizá-lo após de ter lido e compreendido as instruções de uso e segurança;
Agendar o uso dos equipamentos e bancadas na planilha disponível no Google drive. Lembrar de desmarcar em caso de imprevistos;
Se precisar usar um mesmo equipamento por dias seguidos, favor informar aos biomédicos do laboratório e ao seu orientador;
Verificar a voltagem elétrica correta antes de ligar um equipamento;
Desligar os equipamentos ao fim do procedimento;
Higienizar e descontaminar os equipamentos após o uso;
Desligar os aparelhos de ar condicionado apenas das salas de estudo. Os aparelhos de ar condicionado das salas de lavagem e laboratórios são de responsabilidade dos biomédicos do setor. Caso haja necessidade de mudança de temperatura, solicitar o consentimento de um deles;
A utilização dos freezers -80C deve ser feita com o acompanhamento dos biomédicos do laboratório. A utilização deve ser registrada informando dia e horário em que o freezer foi aberto. Para evitar a queda de temperatura, os freezers devem ser abertos e fechados de forma rápida, portanto organizem o posicionamento do material;
Qualquer defeito nos equipamentos do laboratório, deverá ser comunicado aos responsáveis técnicos;
Sempre que possível verificar o funcionamento correto e temperaturas apropriadas de geladeiras e freezers do setor (principalmente aos finais de semana e feriados.
Sempre deixar as pipetas automáticas carregadas.
Descarte de materiais e reagentes
NUNCA jogar gelo seco na pia. Procurar os biomédicos do laboratório para armazenamento. Se o estoque já estiver cheio, manter em isopor aberto para evaporar;
Não despeje material insolúvel ou tóxico nas pias de lavagem. Use um frasco de resíduos apropriado;
Material tóxico e/ou contaminante deve ser descartado no lixo hospitalar (com saco branco);
Não descartar no lixo branco restos de comida, embalagens ou qualquer tipo de material não infectante. O lixo branco é incinerado e o processo tem um custo muito elevado;
Material perfurocortante (como lâminas de vidro, agulhas) deve ser descartado nos descarpack (caixa amarela);
O descarpack deve ser preenchido apenas em 80% da sua capacidade (linha indicativa pontilhada da caixa). Sempre que tiver cheio, fechar a caixa e montar uma nova. A caixa cheia deve ser descartada devidamente fechada e lacrada no lixo branco;
Vidros ou embalagens de reagentes para descarte (mesmo que vazios) devem ser armazenados para descarte correto. Informar aos biomédicos do laboratório.
Sala de cultura
Planejar os experimentos com antecedência e agendá-los na planilha;
Usar EXCLUSIVAMENTE calça comprida e sapatos fechados durante os procedimentos na sala de cultura;
Manter cabelos longos presos;
Manter a porta da sala de cultura totalmente fechada, independentemente de a sala estar ou não ocupada;
Uso OBRIGATÓRIO de avental descartável, protetor para os pés descartável e luvas estéreis durante toda a permanência na sala de cultura;
Nunca utilizar aventais comuns ou que foram utilizados fora da sala de cultura;
Colocar nome e data nos aventais descartáveis em uso e trocá-los periodicamente;
Não acumular protetores para os pés na porta da sala de cultura. Eles podem ser reaproveitados, porém devem ser trocados periodicamente; - Não sair da sala de cultura com o avental descartável e protetores de pés. Caso saia, descartá-los no lixo branco localizado na porta externa;
Evitar levar mais do que o estritamente necessário (cadernos, canetas e objetos pessoais) para evitar contaminação;
Não levar celular para a sala de cultura;
Identificar todos os reagentes e frascos da geladeira com nome do responsável e data;
Esterilizar com álcool 70% os frascos antes e após colocá-los no banho-maria;
Manter as pissetas de álcool 70% do fluxo e bancada sempre cheias; repor o álcool quando estiver acabando;
Evitar acumular materiais em cima da geladeira/bancadas/ dentro do fluxo; guardá-los nos respectivos armários;
Colaborar com a compra de materiais de uso em comum (ex. avental descartável e protetor para os pés);
Observar atentamente e manter o regime de limpeza afixado na sala. Os usuários da sala de cultura devem participar do rodízio de limpeza que ocorre mensalmente/quinzenalmente/ semanalmente (depende do equipamento). Os usuários da sala de cultura devem combinar entre si as escalas de limpeza.
Áreas comuns de laboratório
Manter portas fechadas e restringir o acesso de pessoas ao recinto do laboratório;
As salas e bancadas devem ser mantidas limpas e em ordem, devendo ser retirados quaisquer materiais que não tenham relação com o trabalho que está sendo executado no momento;
As superfícies de trabalho devem ser descontaminadas e limpas com álcool 70% e/ou hipoclorito de sódio antes e após a sua utilização;
Áreas comuns não laboratoriais
Zelar pela limpeza e organização de todas as áreas comuns do laboratório;
Informar para a secretária ou para os biomédicos do laboratório, qualquer problema com a rede hidráulica e elétrica.
Na cozinha: manter os alimentos devidamente acondicionados e identificados; verificar validade e condições de consumo dos alimentos com frequência; lavar e guardar a louça que utilizar; manter a pia seca e o ralo limpo; higienizar a mesa sempre que necessário com álcool 70%; não deixar restos de alimentos expostos na mesa ou caídos no chão.
Nos banheiros: repor papel higiênico e papel toalha sempre que necessário; certificar-se do fechamento correto das torneiras; não jogar papel, absorventes e etc no vaso sanitário; dar descarga quantas vezes forem necessárias.
Nas salas de estudo: manter objetos pessoais, bolsas e mochilas nos armários; evitar longas conversas e manter o silêncio.
Em caso de acidente, por mais insignificante que pareça, manter a calma e comunicar imediatamente aos responsáveis pelo laboratório (biomédicos e orientadores);
Evitar aglomerações na área;
Se necessário deve ser acionado o serviço de emergência médica;
Cortes ou ferimentos, mesmo leves, devem ser lavados com água em abundância;
Queimaduras com fogo, material quente ou produtos químicos devem ser lavadas apenas com água em abundância;
No caso de contato com os olhos, estes devem ser lavados com água em abundância, por no mínimo 15 minutos;
Em caso de derramamento de líquidos, o local deverá ser imediatamente limpo tomando-se os cuidados necessários para cada tipo de produto (consultar os biomédicos do laboratório para orientações cabíveis).
Quais os objetivos da aplicação de “boas condutas laboratoriais”
Promover a elevação do nível de qualidade do trabalho realizado no ambiente de laboratório;
Aumentar a confiabilidade nos resultados obtidos em experimentos e testes realizados no laboratório;
Aumentar a eficácia dos reagentes, produtos, kits e substâncias utilizados;
Melhorar a qualificação dos profissionais de laboratório;
Homogeneizar as práticas de laboratório, com fins de garantir a reprodutibilidade dos resultados obtidos
ORGANIZAÇÃO MUNDIAL DA SAÚDE. Manual de segurança biológica em laboratório. 3 ed. Genebra, 203p, 2004.
Riscos Biológicos Guia Técnico: Os riscos biológicos no âmbito da Norma Regulamentadora Nº 32, 2008.
Secretaria da Saúde. Superintendência de Vigilância e Proteção da Saúde. Diretoria de Vigilância e Controle Sanitário. BRASIL. Universidade Federal da Bahia. Instituto de Ciências da Saúde. Manual de Biossegurança. Salvador. 2001.